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ELISA试剂盒在试验过程中需要注意什么

  ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验确诊方法。尽管ELISA试剂盒的操作过程看似简单,但没做到位的话就会影响试验的作用。所以在试验过程中这几点非常重要:
 
  1、重要的洗刷:
 
  不充分的洗刷会导致差异和高布景,从而带来不抱负的试验结果。假如未结合的材料残留在微孔板中,那么它会添加布景噪音。有必要的话,可添加洗刷液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反响。假如布景过高,置疑洗刷不行时,能够测验添加洗刷次数。
 
  2、关键的关闭:
 
  关闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的时机。假如布景过高,置疑关闭不充分,那么能够测验运用更高浓度的关闭液,或适当延伸关闭时间。

ELISA试剂盒


 
  现在主要有两种类型的关闭液:蛋白和非离子型去污剂。ELISA试剂盒运用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的关闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
 
  3、抗体浓度须优化:
 
  假如试剂稍有不同,则或许需求优化抗体的量。非特异的抗体结合会添加布景。为了防止这一点,切勿运用过多的一抗或二抗。
 
  4、检测试剂要适量:
 
  切勿运用过多的检测试剂。假如浓度过高,ELISA试剂盒或许未正确稀释,则会导致高布景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。
 
  只要确保每一步操作都做到位,才会出现的试验结果。所以ELISA试验的每一步都很重要,不能够漫不经心。

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